ISO 13629-1:2025
(Main)Textiles — Determination of antifungal activity of textile products — Part 1: Luminescence method
Textiles — Determination of antifungal activity of textile products — Part 1: Luminescence method
This document specifies a test method for the quantitative determination of the antifungal activity by measuring the intensity of luminescence produced by an enzymatic reaction [adenosine triphosphate (ATP) method]. This document is applicable to various kinds of textile products, such as fibres, yarns, fabrics, clothing, bedclothes, home furnishings and other miscellaneous goods.
Textiles — Détermination de l'activité antifongique des produits textiles — Partie 1: Méthode par luminescence
Le présent document spécifie une méthode d’essai pour la détermination quantitative de l’activité antifongique en mesurant l’intensité de la luminescence produite par une réaction enzymatique [méthode de l’ATP (adénosine triphosphate)]. Le présent document s’applique aux différents types de produits textiles, tels que les fibres, les fils, les étoffes, les vêtements, les couvertures et les draps, les tissus d’ameublement et divers autres types d’articles.
General Information
Relations
Standards Content (Sample)
International
Standard
ISO 13629-1
Second edition
Textiles — Determination of
2025-05
antifungal activity of textile
products —
Part 1:
Luminescence method
Textiles — Détermination de l'activité antifongique des produits
textiles —
Partie 1: Méthode par luminescence
Reference number
© ISO 2025
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Published in Switzerland
ii
Contents Page
Foreword .v
Introduction .vi
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 2
5 Warning . 2
6 Reference fungi. 2
7 Apparatus . 2
8 Reagents and culture media . 4
8.1 General .4
8.2 Pure water .4
8.3 Anionic surfactant .4
8.4 Luminescent reagents, reagents and buffer solutions .4
8.4.1 General .4
−3
8.4.2 ATP standard stock solution (1 × 10 mol/l) referred to as ATP standard
hereafter .4
8.4.3 Buffer solution for ATP luminescent reagent .4
8.4.4 ATP luminescent reagent .5
8.4.5 ATP extraction reagent .5
8.4.6 ATP eliminating reagent .5
8.4.7 Physiological saline solution .5
8.4.8 Sterilized water containing anionic surfactant .6
8.5 Culture medium .6
8.5.1 General .6
8.5.2 Sabouraud dextrose broth (SDB) .6
8.5.3 Potato dextrose agar (PDA) .6
8.5.4 Slant culture .6
8.5.5 Sabouraud dextrose agar (SDA) .6
9 Fungus preservation and use . 7
9.1 Fungus preservation .7
9.2 Use of fungus .7
10 Spore suspension . . 7
10.1 General .7
10.2 Suspending spores in culture media .8
10.3 Collection and dispersion of spore suspension from a culture medium .8
10.4 Filtering to remove hyphae and spore threads .8
10.5 Using centrifugal separation and resuspension to remove supernatant .8
10.6 Confirming the concentration of spore suspension .9
10.7 Adjusting spore suspension for testing .9
11 Preparing the ATP calibration curve . 9
12 Testing method . 10
12.1 Preparation of test specimens and inoculation.10
12.1.1 General .10
12.1.2 Absorption method .10
12.1.3 Transfer method . 12
12.2 Incubation . 12
12.2.1 Absorption method . 12
12.2.2 Transfer method . 12
iii
13 Measurement of luminescence intensity .12
13.1 Absorption method . 12
13.2 Transfer method .14
14 Calculation . 14
14.1 Judgment of test effectiveness .14
14.2 Calculation of antifungal activity value . 15
15 Judgement of antifungal efficacy .15
16 Test report .15
Annex A (normative) Fungi used in this document .16
Annex B (informative) Antifungal efficacy . 17
Bibliography .18
iv
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through
ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee
has been established has the right to be represented on that committee. International organizations,
governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely
with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are described
in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the different types
of ISO document should be noted. This document was drafted in accordance with the editorial rules of the
ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
ISO draws attention to the possibility that the implementation of this document may involve the use of (a)
patent(s). ISO takes no position concerning the evidence, validity or applicability of any claimed patent
rights in respect thereof. As of the date of publication of this document, ISO had not received notice of (a)
patent(s) which may be required to implement this document. However, implementers are cautioned that
this may not represent the latest information, which may be obtained from the patent database available at
www.iso.org/patents. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and expressions
related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the World Trade
Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT), see www.iso.org/iso/foreword.html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 38, Textiles.
This second edition cancels and replaces the first edition (ISO 13629-1:2012), which has been technically
revised.
The main changes are as follows:
— in subclause 8.4.6, the adenosine phosphate deaminase content has been corrected from 46 international
units/ml to 4,6 international units/ml;
— in subclause 13.1:
— new steps h) and i) have been added to the absorption method;
— a new Formula (2) have been added and subsequent formulae have been renumbered;
— in subclause 13.2, new steps h) and i) have been added to the transfer method;
— figures have been updated;
— in Table A.1, the fungal type cladosporium cladosporioides has been corrected to cladosporium
sphaerospermum.
A list of all parts in the ISO 13629 series can be found on the ISO website.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www.iso.org/members.html.
v
Introduction
Speciality products of antimicrobial-treated textiles have been increasing year by year in various applications
and they certainly contribute to the prevention of a material’s deterioration and to the improvement of the
environment and quality of life.
For these reasons, ISO/TC 38 developed ISO 20743 in 2007, and is continuing to study a test method on the
antifungal activity of textile products for a series of International Standards.
This document adopts an adenosine triphosphate (ATP) luminescence method as a basis for the quantitative
determination of antifungal activity.
Characteristics of the luminescence method are as follows:
— extremely small margin of error compared to the colony count method;
— elimination of the culturing time for colony formation, enabling a shorter testing time;
— simplification of testing operation.
vi
International Standard ISO 13629-1:2025(en)
Textiles — Determination of antifungal activity of textile
products —
Part 1:
Luminescence method
1 Scope
This document specifies a test method for the quantitative determination of the antifungal activity by
measuring the intensity of luminescence produced by an enzymatic reaction [adenosine triphosphate (ATP)
method].
This document is applicable to various kinds of textile products, such as fibres, yarns, fabrics, clothing,
bedclothes, home furnishings and other miscellaneous goods.
2 Normative references
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content constitutes
requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For undated references,
the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 105-F02, Textiles — Tests for colour fastness — Part F02: Specification for cotton and viscose adjacent fabrics
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
ISO and IEC maintain terminological databases for use in standardization at the following addresses:
— ISO Online browsing platform: available at https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: available at https:// www .electropedia .org/
3.1
control specimen
specimen used to validate the growth condition of test fungus
Note 1 to entry: The control specimen can be taken from the same textile products as the textile products to be tested,
but without antifungal treatment. If this is not available, a 100 % cotton specimen without fluorescent brighteners
or other finish, conforming with the requirements of ISO 105-F02, is used as the control specimen, after 10 cycles of
washing for 10 min at a temperature of 60 °C without detergents or any brighteners and rinsing twice for 5 min in
accordance with ISO 6330.
3.2
antifungal agent
substance which prevents or mitigates the growth of fungus or to reduce the number of fungus
3.3
spore suspension
liquid with evenly dispersed fungal spores in sterilized water containing an anionic surfactant
3.4
adenosine triphosphate
ATP
multifunctional nucleotide present in living fungi
3.5
antifungal activity
property which prevents or mitigates the growth of fungus, expressed as the difference of growth value in
logarithm of ATP between the control and test specimen
3.6
luminescence method
procedure in which the amount of ATP contained in fungal cells is measured in moles of ATP
4 Principle
A test specimen and control specimen are inoculated with a spore suspension of a reference fungus and
incubated at 25 °C for 42 h.
In this document, fungal growth or antifungal activity is determined quantitatively, by comparison with the
result of a control specimen, by measuring the luminescence intensity of intracellular ATP.
Based on the intended application and on the environment in which the textile product is intended to be used,
the user can select the most suitable evaluation method from the following methods before enumeration by
the ATP method:
a) absorption method (an evaluation method in which test fungi suspension is inoculated directly onto the
specimens);
b) transfer method (an evaluation method in which test fungi are placed on an agar plate and printed onto
the specimens).
5 Warning
The test methods specified in this document require the use of fungus. This test should be carried out by
persons with training and experience in the use of microbiological techniques.
Handling and manipulation of fungi which is potentially hazardous requires a high degree of technical
competence and may be subject to current national legislation and regulations. Appropriate safety
precautions should be observed with due consideration given to country-specific regulations. Only
personnel trained in biological techniques should carry out such tests. Appropriate practices for disinfection,
sterilization and personnel hygiene shall be strictly observed.
6 Reference fungi
The fungi to be used shall be selected from Table A.1 in Annex A.
Equivalent fungi types obtained from other agencies of the World Federation for Culture Collection (WFCC)
may be used, as agreed upon between the interested parties.
The preservation number and supply source of the fungus used shall be stated in the test report.
7 Apparatus
Usual laboratory apparatus and, in particular, the following.
Test tubes, vials, flasks, pipettes and tweezers shall be carefully washed in alkaline or neutral detergent,
rinsed, dried, and processed by dry sterilization or high-pressure steam sterilization before use.
7.1 Gauze, for biochemical testing or glass wool.
7.2 Petri dishes, with internal diameters of approximately 90 mm and 55 mm to 60 mm.
7.3 Dry sterilizer, capable of maintaining the temperature at 160 °C to 180 °C.
7.4 Autoclave, capable of maintaining the temperature at (121 ± 2) °C (equivalent to 103 kPa).
7.5 Safety cabinet, for biochemical testing, or one that offers equivalent performance.
7.6 Platinum colony loop, with a loop of 2 mm to 4 mm in diameter.
7.7 L-shaped platinum colony hook.
7.8 Incubator, capable of maintaining the target temperature range of 20 °C to 37 °C with a margin of ±2 °C.
7.9 Vial, 30 ml screw-top glass vial with polytetrafluoroethylene or silicone gasket and polypropylene cap.
7.10 Glass rod, between 5 mm and 18 mm in diameter and 1 g to 50 g in mass.
7.11 Glass funnel.
7.12 Pipettes, of capacity 0,05 ml, 0,1 ml, 0,2 ml,1 ml, 5 ml and 10 ml with a tolerance of 5,0 %.
7.13 Pasteur pipette, for microbiological testing.
7.14 Conical flask, of capacity 100 ml to 500 ml.
7.15 Tweezers.
7.16 Plastic test tube, especially for the luminometer.
7.17 Test-tube agitator.
7.18 Centrifugal separator, with a centrifugal acceleration of approximately 2 000 g.
7.19 Centrifuge tube, used in a centrifugal separator.
6 6
7.20 Hemocytometer, capable of measuring 1 × 10 /ml to 3 × 10 /ml.
7.21 Microscope, magnification 200×.
7.22 Ultrasonic cleaner, compact, for experimental tools, with a frequency of approximately 30 kHz to 50 kHz.
7.23 Luminometer, measuring at a wavelength of 300 nm to 650 nm, and capable of ATP measurement at
–8 –5
1 × 10 mol/l to 1 × 10 mol/l, under the assay conditions defined in 8.4 and Clause 11.
7.24 pH-meter, with an accuracy of ±0,1 at 25 °C.
7.25 Refrigerator, capable of maintaining a temperature of between 2 °C and 10 °C.
7.26 Two freezers, one adjustable to a temperature below –80 °C and another to a temperature below –20 °C.
8 Reagents and culture media
8.1 General
Reagents used in tests shall be of analytical quality and/or suitable for microbiological purposes.
Dehydrated products available on the commercial market are recommended for use in preparing the culture
media, strictly in accordance with the manufacturer's instructions.
8.2 Pure water
Analytical-grade water for microbiological media and reagent preparation, which is freshly distilled and/or
ion-exchanged and/or ultra-filtered and/or filtered with reverse osmosis (RO). It shall be free from all toxic
or fungus-inhibitory substances.
8.3 Anionic surfactant
Dioctyl sodium sulfosuccinate to prepare the spore suspension.
8.4 Luminescent reagents, reagents and buffer solutions
8.4.1 General
Use reagents and buffer solutions prepared as shown in 8.4.2 to 8.4.8. Commercially prepared items may be
used after appropriate validation.
−3
8.4.2 ATP standard stock solution (1 × 10 mol/l) referred to as ATP standard hereafter
Adenosine-disodium 5'-triphosphate trihydrate 60,5 mg
(C H O P Na ·3H O)
10 14 13 3 2 2
Pure water (8.2) 100 ml (final volume)
Place the prepared solution in a tightly sealed container and freeze at a temperature of –20 °C or lower for
storage of up to 6 months.
It is not recommended to refreeze and/or reuse a melted solution.
8.4.3 Buffer solution for ATP luminescent reagent
N-[Tris(hydroxymethyl)methyl] glycine 1 117 mg
Disodium salt of ethylenediaminetetraacetic acid dihydrate 183 mg
Magnesium acetate tetrahydrate 808 mg
DL-dithiothreitol 6,7 mg
Dextrin 25 000 mg
Sucrose 925 mg
Pure water 250 ml (final volume)
pH 7,5 ± 0,2
8.4.4 ATP luminescent reagent
−8
ATP luminescent reagents shall enable a luminometer (7.23) to measure the ATP of 1 × 10 mol/l to
−5
1 × 10 mol/l, under the assay conditions defined in 8.4 and Clause 11.
Luciferase 0,7 mg
D-luciferin 12,6 mg
Bovine serum albumin 56 mg
Buffer solution (see 8.4.3) 30 ml
Once fully dissolved, stand at room temperature for 15 min before use. Use within 3 h of preparation.
8.4.5 ATP extraction reagent
ATP extraction reagents must be able to extract intracellular ATP from the incubated fungus with an
efficiency of 80 % or higher.
N-[Tris(hydroxymethyl)methyl] glycine 45 mg
Benzalkonium chloride, 10 % aqueous solution 0,2 ml
Pure water 9,8 ml
pH (use sodium hydroxide to adjust pH) 12,0 ± 0,5
The use of any unspecified extracting agent in the composition shall be recorded.
8.4.6 ATP eliminating reagent
−11
ATP eliminating reagents shall reduce the culture medium ATP content to less than 10 mol/l within
15 min when one-tenth of the reagent in quantity is added to the culture medium (defined in 8.5.2).
Use within 8 h of preparation.
The composition is as follows:
Apyrase (EC: 3.6.1.5) 4,6 international units/ml
Adenosine phosphate deaminase (EC: 3.5.4.6 or 3.5.4.17) 4,6 international units/ml
Sucrose 37 mg
Bovine serum albumin 20 mg
0,05 mol/l buffer solution of 2-morpholinoethanesulfonic 10 ml
acid, monohydrate
pH 6,0 ± 0,5
When a different eliminating reagent is used, its composition shall be recorded.
8.4.7 Physiological saline solution
Place 8,5 g of sodium chloride in 1 000 ml of pure water in a flask. Thoroughly dissolve and pour it into test
tubes as needed for steam pr
...
Norme
internationale
ISO 13629-1
Deuxième édition
Textiles — Détermination de
2025-05
l'activité antifongique des produits
textiles —
Partie 1:
Méthode par luminescence
Textiles — Determination of antifungal activity of textile
products —
Part 1: Luminescence method
Numéro de référence
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publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Genève
Tél.: +41 22 749 01 11
E-mail: copyright@iso.org
Web: www.iso.org
Publié en Suisse
ii
Sommaire Page
Avant-propos .v
Introduction .vi
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe. 2
5 Avertissement . 2
6 Champignons de référence. 2
7 Appareillage . 3
8 Réactifs et milieux de culture . 4
8.1 Généralités .4
8.2 Eau pure .4
8.3 Tensio-actif anionique .4
8.4 Réactifs luminescents, réactifs et solutions tampons .4
8.4.1 Généralités .4
−3
8.4.2 Solution étalon mère d’ATP (1 × 10 mol/l) appelée «étalon ATP» ci-après .4
8.4.3 Solution tampon pour réactif luminescent ATP .5
8.4.4 Réactif luminescent ATP . .5
8.4.5 Réactif d’extraction de l’ATP .5
8.4.6 Réactif d’élimination de l’ATP .5
8.4.7 Solution saline physiologique .6
8.4.8 Eau stérilisée contenant un tensio-actif anionique .6
8.5 Milieu de culture .6
8.5.1 Généralités .6
8.5.2 Bouillon de Sabouraud au dextrose (SDB) .6
8.5.3 Gélose à la pomme de terre et au dextrose (PDA).6
8.5.4 Culture inclinée .6
8.5.5 Gélose de Sabouraud au dextrose (SDA).7
9 Conservation et utilisation du champignon. 7
9.1 Conservation du champignon.7
9.2 Utilisation du champignon .8
10 Suspension de spores . 8
10.1 Généralités .8
10.2 Suspension de spores dans des milieux de culture.9
10.3 Collecte et dispersion de la suspension de spores à partir d’un milieu de culture .9
10.4 Filtration pour éliminer les hyphes et les filaments de spore .9
10.5 Utilisation de la séparation centrifuge et re-suspension pour éliminer le liquide
surnageant .9
10.6 Confirmation de la concentration de la suspension de spores .9
10.7 Ajustement de la suspension de spores pour les essais .10
11 Préparation de la courbe d’étalonnage de l’ATP . 10
12 Méthode d’essai .11
12.1 Préparation des éprouvettes et inoculation .11
12.1.1 Généralités .11
12.1.2 Méthode par absorption .11
12.1.3 Méthode par transfert . 12
12.2 Incubation . 13
12.2.1 Méthode par absorption . 13
12.2.2 Méthode par transfert . 13
iii
13 Mesurage de l’intensité de la luminescence.13
13.1 Méthode par absorption . . 13
13.2 Méthode par transfert .14
14 Calcul .15
14.1 Évaluation de l’efficacité de l’essai . 15
14.2 Calcul de la valeur d’activité antifongique . 15
15 Évaluation de l’efficacité antifongique .16
16 Rapport d’essai .16
Annexe A (normative) Champignons utilisés dans le présent document . 17
Annexe B (informative) Efficacité antifongique .18
Bibliographie . 19
iv
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes nationaux
de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est en général
confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire
partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux. L’ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document
a été rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2
(voir www.iso.org/directives).
L’ISO attire l’attention sur le fait que la mise en application du présent document peut entraîner l’utilisation
d’un ou de plusieurs brevets. L’ISO ne prend pas position quant à la preuve, à la validité et à l’applicabilité
de tout droit de brevet revendiqué à cet égard. À la date de publication du présent document, l’ISO n’avait
pas reçu notification qu’un ou plusieurs brevets pouvaient être nécessaires à sa mise en application.
Toutefois, il y a lieu d’avertir les responsables de la mise en application du présent document que des
informations plus récentes sont susceptibles de figurer dans la base de données de brevets, disponible à
l’adresse www.iso.org/brevets. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne pas avoir identifié tout ou
partie de tels droits de brevet.
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données pour
information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion de
l’ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles techniques au
commerce (OTC), voir www.iso.org/iso/fr/avant-propos.html.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 38, Textiles.
Cette deuxième édition annule et remplace la première édition (ISO 13629-1:2012), qui a fait l’objet d’une
révision technique.
Les principales modifications sont les suivantes:
— en 8.4.6, la teneur en adénosine phosphate désaminase a été corrigée de 46 unités internationales/ml à
4,6 unités internationales/ml;
— en 13.1:
— les nouvelles étapes h) et i) ont été ajoutées à la méthode par absorption;
— une nouvelle Formule (2) a été ajoutée et les formules suivantes ont été renumérotées;
— en 13.2, les nouvelles étapes h) et i) ont été ajoutées à la méthode par transfert;
— les figures ont été mises à jour;
— dans le Tableau A.1, le type de champignon cladosporium cladosporioides a été corrigé en cladosporium
sphaerospermum.
Une liste de toutes les parties de la série ISO 13629 se trouve sur le site web de l’ISO.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes se
trouve à l’adresse www.iso.org/fr/members.html.
v
Introduction
L’utilisation de produits spécialisés dans les textiles antimicrobiens se développe d’année en année pour
diverses applications. Ces produits contribuent certainement à la prévention de la détérioration des
matériaux et à l’amélioration de l’environnement et de la qualité de vie.
Pour ces raisons, l’ISO/TC 38 a élaboré l’ISO 20743 en 2007 et continue à étudier une méthode d’essai portant
sur l’activité antifongique des produits textiles sous la forme d’une série de Normes internationales.
Le présent document adopte une méthode par luminescence de l’adénosine triphosphate (ATP) comme base
pour la détermination quantitative de l’activité antifongique.
Les caractéristiques de la méthode par luminescence sont les suivantes:
— marge d’erreur extrêmement faible comparativement à la méthode par dénombrement de colonies;
— élimination du temps de culture pour la formation des colonies et, par conséquent, obtention d’un temps
d’essai plus court;
— simplification du déroulement de l’essai.
vi
Norme internationale ISO 13629-1:2025(fr)
Textiles — Détermination de l'activité antifongique des
produits textiles —
Partie 1:
Méthode par luminescence
1 Domaine d’application
Le présent document spécifie une méthode d’essai pour la détermination quantitative de l’activité
antifongique en mesurant l’intensité de la luminescence produite par une réaction enzymatique [méthode
de l’ATP (adénosine triphosphate)].
Le présent document s’applique aux différents types de produits textiles, tels que les fibres, les fils, les
étoffes, les vêtements, les couvertures et les draps, les tissus d’ameublement et divers autres types d’articles.
2 Références normatives
Les documents suivants sont cités dans le texte de sorte qu’ils constituent, pour tout ou partie de leur
contenu, des exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique. Pour
les références non datées, la dernière édition du document de référence s'applique (y compris les éventuels
amendements).
ISO 105-F02, Textiles — Essais de solidité des teintures — Partie F02: Spécifications pour les tissus témoins en
coton et en viscose
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en normalisation,
consultables aux adresses suivantes:
— ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: disponible à l’adresse https:// www .electropedia .org/
3.1
éprouvette témoin
éprouvette utilisée pour confirmer la croissance du champignon d’essai
Note 1 à l'article: L’éprouvette témoin peut être issue des mêmes produits textiles que ceux soumis à essai, mais sans
traitement antifongique. Si une telle éprouvette n’est pas disponible, une éprouvette 100 % coton sans azurant optique
ou autre apprêt, conforme aux exigences de l’ISO 105-F02, est utilisée comme éprouvette témoin après 10 cycles de
lavage de 10 min à une température de 60 °C sans détergents ni azurants et un double rinçage de 5 min conformément
à l’ISO 6330.
3.2
agent antifongique
substance qui empêche ou réduit la croissance de champignons ou qui réduit leur nombre
3.3
suspension de spores
liquide contenant des spores fongiques uniformément réparties dans de l’eau stérilisée contenant un tensio-
actif anionique
3.4
adénosine triphosphate
ATP
nucléotide multifonctionnel présent dans les champignons vivants
3.5
activité antifongique
propriété qui empêche ou réduit la croissance de champignons, exprimée sous forme de différence de la
valeur de croissance en logarithme de l’ATP entre l’éprouvette témoin et l’éprouvette d’essai
3.6
méthode par luminescence
mode opératoire dans lequel la quantité d’ATP contenue dans les cellules fongiques est mesurée en moles d’ATP
4 Principe
Une éprouvette d’essai et une éprouvette témoin sont inoculées avec une suspension de spores d’un
champignon de référence et incubées à 25 °C pendant 42 h.
Dans le présent document, la croissance fongique ou l’activité antifongique sont déterminées de manière
quantitative, par comparaison avec le résultat obtenu avec une éprouvette témoin, en mesurant l’intensité
de la luminescence de l’ATP intracellulaire.
En fonction de l’application prévue et de l’environnement dans lequel le produit textile est destiné à être
utilisé, l’utilisateur peut choisir la méthode d’évaluation qui convient le mieux parmi les suivantes, avant le
dénombrement avec la méthode de l’ATP:
a) la méthode par absorption (méthode d’évaluation dans laquelle la suspension de champignons d’essai
est inoculée directement sur les éprouvettes);
b) la méthode par transfert (méthode d’évaluation dans laquelle les champignons d’essai sont placés sur
une boîte de milieu gélosé et transférés sur les éprouvettes).
5 Avertissement
Les méthodes d’essai spécifiées dans le présent document nécessitent l’utilisation de champignons. Il
convient que cet essai soit réalisé par des personnes ayant reçu une formation et ayant de l’expérience dans
l’utilisation des techniques microbiologiques.
La manipulation et la gestion des champignons potentiellement dangereux exigent un haut degré de
compétence technique et peuvent être soumises à la législation et aux réglementations nationales en vigueur.
Il convient d’observer les précautions de sécurité appropriées en tenant compte des réglementations
spécifiques à chaque pays. Il convient que seul le personnel formé aux techniques biologiques réalise de tels
essais. Les pratiques appropriées pour la désinfection, la stérilisation et l’hygiène du personnel doivent être
strictement observées.
6 Champignons de référence
Les champignons à utiliser doivent être choisis dans le Tableau A.1 de l’Annexe A.
Des types de champignons équivalents obtenus auprès d’autres agences de la Fédération mondiale des
collections de cultures (World Federation for Culture Collections — WFCC) peuvent être utilisés sous
réserve d’un accord entre les parties intéressées.
Le numéro de conservation et la provenance de la souche du champignon utilisé doivent être mentionnés
dans le rapport d’essai.
7 Appareillage
Matériel de laboratoire courant et, en particulier, ce qui suit.
Les tubes à essai, flacons, fioles, pipettes et pinces, doivent être soigneusement lavés dans un détergent
alcalin ou neutre, rincés, séchés et traités par stérilisation à sec ou par stérilisation à la vapeur sous haute
pression avant utilisation.
7.1 Gaze, pour les essais biochimiques, ou laine de verre.
7.2 Boîtes de Petri, d’un diamètre intérieur d’environ 90 mm et de 55 mm à 60 mm.
7.3 Stérilisateur à sec, pouvant maintenir la température entre 160 °C et 180 °C.
7.4 Autoclave, pouvant maintenir la température à (121 ± 2) °C (équivalent à 103 kPa).
7.5 Poste de sécurité microbiologique, pour les essais biochimiques ou offrant des performances
équivalentes.
7.6 Anse d’ensemencement en platine, de 2 mm à 4 mm de diamètre.
7.7 Fil d’ensemencement en platine en forme de L.
7.8 Incubateur, pouvant maintenir la température cible dans une plage comprise entre 20 °C et 37 °C avec
une tolérance de ±2 °C.
7.9 Flacon, à bouchon à vis de 30 ml en verre, avec un joint en polytétrafluoroéthylène ou en silicone et un
bouchon en polypropylène.
7.10 Baguette de verre, d’un diamètre compris entre 5 mm et 18 mm et d’une masse comprise entre 1 g et 50 g.
7.11 Entonnoir en verre.
7.12 Pipettes, d’une capacité de 0,05 ml, 0,1 ml, 0,2 ml, 1 ml, 5 ml et 10 ml avec une tolérance de 5,0 %.
7.13 Pipette Pasteur, pour les essais microbiologiques.
7.14 Fiole conique, d’une capacité comprise entre 100 ml et 500 ml.
7.15 Pinces.
7.16 Tube à essai en plastique, spécialement conçu pour le luminomètre.
7.17 Agitateur pour tubes à essai.
7.18 Séparateur centrifuge, ayant une accélération centrifuge d’environ 2 000 g.
7.19 Tube à centrifuger, utilisé dans un séparateur centrifuge.
6 6
7.20 Hématimètre, permettant de réaliser des mesures entre 1 × 10 /ml et 3 × 10 /ml.
7.21 Microscope, d’un grossissement × 200.
7.22 Nettoyeur à ultrasons, compact, pour les outils d’expérimentation, ayant une fréquence
d’environ 30 kHz à 50 kHz.
7.23 Luminomètre, mesurant à une longueur d’onde comprise entre 300 nm et 650 nm, et permettant de
−8 −5
réaliser des mesures de l’ATP entre 1 × 10 mol/l et 1 × 10 mol/l, dans les conditions d’essai définies en
8.4 et à l’Article 11.
7.24 pH-mètre, d’une précision de ±0,1 à 25 °C.
7.25 Réfrigérateur, pouvant maintenir la température entre 2 °C et 10 °C.
7.26 Deux congélateurs, l’un étant réglable à une température inférieure à –80 °C et l’autre à une
température inférieure à –20 °C.
8 Réactifs et milieux de culture
8.1 Généralités
Les réactifs utilisés lors des essais doivent être de qualité analytique et/ou adaptés pour les essais
microbiologiques.
Il est recommandé d’utiliser des produits déshydratés disponibles dans le commerce pour la préparation des
milieux de culture, en respectant scrupuleusement les instructions du fabricant.
8.2 Eau pure
Eau de qualité analytique pour la préparation des milieux microbiologiques et des réactifs, fraîchement
distillée et/ou passée sur résine échangeuse d’ions et/ou ultra-filtrée et/ou filtrée par osmose inverse (OI).
Elle doit être exempte de substances toxiques ou inhibitrices pour les champignons.
8.3 Tensio-actif anionique
Dioctyl sulfosuccinate de sodium pour préparer la suspension de spores.
8.4 Réactifs luminescents, réactifs et solutions tampons
8.4.1 Généralités
Utiliser des réactifs et des solutions tampons préparés comme indiqué de 8.4.2 à 8.4.8. Des produits préparés
du commerce peuvent être utilisés après une validation appropriée.
−3
8.4.2 Solution étalon mère d’ATP (1 × 10 mol/l) appelée «étalon ATP» ci-après
Adénosine-5’-triphosphate disodique trihydraté 60,5 mg
(C H O P Na ·3H O)
10 14 13 3 2 2
Eau pure (8.2) 100 ml (volume final)
Placer la solution préparée dans un récipient hermétiquement fermé et congeler à une température de –20 °C
ou inférieure pour une conservation pendant 6 mois au maximum.
Il n’est pas recommandé de recongeler et/ou de réutiliser une solution ayant été décongelée.
8.4.3 Solution tampon pour réactif luminescent ATP
N-[Tris(hydroxyméthyl)méthyl] glycine 1 117 mg
Sel disodique de l’acide éthylènediaminetétraacétique dihydraté 183 mg
Acétate de magnésium tétrahydraté 808 mg
DL-dithiothreitol 6,7 mg
Dextrine 25 000 mg
Sucrose 925 mg
Eau pure 250 ml (volume final)
pH 7,5 ± 0,2
8.4.4 Réactif luminescent ATP
Les réactifs luminescents ATP doivent permettre à un luminomètre (7.23) de mesurer l’ATP
−8 −5
entre 1 × 10 mol/l et 1 × 10 mol/l, dans les conditions d’essai définies en 8.4 et à l’Article 11.
Luciférase 0,7 mg
D-luciférine 12,6 mg
Albumine de sérum bovin 56 mg
Solution tampon (voir 8.4.3) 30 ml
Après dissolution complète, laisser reposer à température ambiante pendant 15 min avant utilisation.
Utiliser dans les 3 h qui suivent la préparation.
8.4.5 Réactif d’extraction de l’ATP
Les réactifs d’extraction de l’ATP doivent permettre d’extraire l’ATP intracellulaire à partir du champignon
incubé avec une efficacité d’au moins 80 %.
N-[Tris(hydroxyméthyl)méthyl] glycine 45 mg
Chlorure de benzalkonium, solution aqueuse à 10 % 0,2 ml
Eau pure 9,8 ml
pH (utiliser de l’hydroxyde de sodium pour ajuster le pH) 12,0 ± 0,5
L’utilisation de tout agent d’extraction non spécifié dans la composition doit être enregistrée.
8.4.6 Réactif d’élimination de l’ATP
Les réactifs d’élimination de l’ATP doivent réduire la teneur en ATP du milieu de culture à moins de
−11
10 mol/l dans les 15 min lorsqu’un dixième du réactif en quantité est ajouté au milieu de culture (défini
en 8.5.2).
Utiliser dans les 8 h qui suivent la préparation.
La composition est la suivante:
Apyrase (CE: 3.6.1.5) 4,6 unités internationales/ml
Adénosine phosphate désaminase (CE: 3.5.4.6 ou 3.5.4.17) 4,6 unités internationales/ml
Sucrose 37 mg
Albumine de sérum bovin 20 mg
Solution tampon à 0,05 mol/l 10 ml
d’acide 2-morpholinoéthanesufonique monohydraté
pH 6,0 ± 0,5
Lorsqu’un réactif d’élimination différent est utilisé, sa composition doit être enregistrée.
8.4.7 Solution saline physiologique
Placer 8,5 g de chlorure de sodium dans 1 000 ml d’eau pure dans une fiole. Dissoudre soigneusement et
transvaser dans des tubes à essai en fonction des besoins en vue de la stérilisation à la vapeur sous pression.
8.4.8 Eau stérilisée contenant un tensio-actif anionique
Dissoudre 50 mg de tensio-actif anionique dans de l’eau pure et compléter à 1 000 ml, puis transvaser dans
des tubes à essai en fonction des besoins en vue de la stérilisation à la vapeur sous haute pression.
8.5 Milieu de culture
8.5.1 Généralités
Utiliser un milieu de culture préparé comme décrit de 8.5.2 à 8.5.5. Des produits préparés du commerce
peuvent être utilisés après une validation appropriée.
Pour les milieux de culture qui ne sont pas utilisés immédiatement après leur préparation, il est recommandé
de les conserver à une température comprise entre 5 °C et 10 °C et de les jeter au bout d’un mois.
8.5.2 Bouillon de Sabouraud au dextrose (SDB)
Peptone 10 g
Dextrose 20 g à 40 g
Eau pure 1 000 ml
pH après stérilisation 5,6 ± 0,2
8.5.3 Gélose à la pomme de terre et au dextrose (PDA)
Laver et éplucher une grande pomme de terre avec le moins de défauts d’aspect possible, en retirant
environ 10 mm autour de chaque bourgeon et couper en cubes de 1
...
Questions, Comments and Discussion
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