ISO 21872-1:2017
(Main)Microbiology of the food chain — Horizontal method for the determination of Vibrio spp. — Part 1: Detection of potentially enteropathogenic Vibrio parahaemolyticus, Vibrio cholerae and Vibrio vulnificus
Microbiology of the food chain — Horizontal method for the determination of Vibrio spp. — Part 1: Detection of potentially enteropathogenic Vibrio parahaemolyticus, Vibrio cholerae and Vibrio vulnificus
ISO 21872-1:2017 specifies a horizontal method for the detection of enteropathogenic Vibrio spp., which causes human illness in or via the intestinal tract. The species detectable by the methods specified include Vibrio parahaemolyticus, Vibrio cholerae and Vibrio vulnificus. ISO 21872-1:2017 is applicable to the following: - products intended for human consumption and the feeding of animals; - environmental samples in the area of food production and food handling.
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Méthode horizontale pour la détermination des Vibrio spp. — Partie 1: Recherche des espèces de Vibrio parahaemolyticus, Vibrio cholerae et Vibrio vulnificus potentiellement entéropathogènes
ISO 21872-1:2017 spécifie une méthode horizontale pour la recherche des espèces entéropathogènes de Vibrio provoquant des maladies dans ou via le tractus intestinal chez l'homme. Les espèces détectables par les méthodes spécifiées incluent Vibrio parahaemolyticus, Vibrio cholerae et Vibrio vulnificus. ISO 21872-1:2017 s'applique: - aux produits destinés à la consommation humaine et à l'alimentation animale; - aux échantillons environnementaux dans le domaine de la production et de la manutention de denrées alimentaires.
General Information
Relations
Standards Content (Sample)
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 21872-1
First edition
2017-06
Microbiology of the food chain —
Horizontal method for the
determination of Vibrio spp. —
Part 1:
Detection of potentially
enteropathogenic Vibrio
parahaemolyticus, Vibrio cholerae and
Vibrio vulnificus
Microbiologie de la chaîne alimentaire — Méthode horizontale pour
la détermination des Vibrio spp. —
Partie 1: Recherche des espèces de Vibrio parahaemolyticus, Vibrio
cholerae et Vibrio vulnificus potentiellement entéropathogènes
Reference number
©
ISO 2017
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Contents Page
Foreword .v
Introduction .vi
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 2
4 Principle . 2
4.1 General . 2
4.2 Primary enrichment in a liquid selective medium . 2
4.3 Secondary enrichment in a liquid selective medium . 3
4.4 Isolation and identification . 3
4.5 Confirmation . 3
5 Culture media and reagents . 3
5.1 Enrichment medium: alkaline saline peptone water (ASPW). 4
5.2 Solid selective isolation media . 4
5.2.1 First medium: thiosulphate, citrate, bile and sucrose agar medium (TCBS) . 4
5.2.2 Second medium. 4
5.3 Saline nutrient agar (SNA) . 4
5.4 Reagent for detection of oxidase . 4
5.5 Biochemical tests . 4
5.5.1 L-lysine decarboxylase saline medium (LDC) . 4
5.5.2 Arginine dihydrolase saline medium (ADH) . 4
5.5.3 Reagent for detection of β-galactosidase . 5
5.5.4 Saline medium for detection of indole . 5
5.5.5 Saline peptone waters . 5
5.5.6 Sodium chloride solution . 5
5.6 PCR . 5
5.6.1 Tris acetate EDTA buffer (TAE) (or a buffer allowing similar performance
for the purpose) . 5
5.6.2 Mastermix . 5
5.6.3 Primers and probes . 5
5.6.4 Positive control material . 5
5.6.5 Negative extraction control . 6
6 Equipment and consumables . 6
7 Sampling . 6
8 Preparation of the test sample . 6
9 Procedure (See Figure A.1) . 7
9.1 Test portion and initial suspension . 7
9.2 Primary selective enrichment . 7
9.3 Secondary selective enrichment . 7
9.4 Isolation and identification . 8
9.5 Confirmation . 8
9.5.1 General. 8
9.5.2 Selection of colonies for confirmation and preparation of pure cultures . 9
9.5.3 Tests for presumptive identification . 9
9.5.4 Biochemical confirmation .10
9.5.5 PCR confirmation .12
9.5.6 DNA extraction .12
9.5.7 Conventional PCR .12
9.5.8 Real-time PCR .13
10 Expression of results .13
11 Performance characteristics of the method .13
11.1 Interlaboratory study .13
11.2 Sensitivity .14
11.3 Specificity .14
11.4 LOD .14
12 Test report .14
Annex A (normative) Diagram of procedure .15
Annex B (normative) Composition and preparation of the culture media and reagents .17
Annex C (informative) Conventional PCR for the detection of Vibrio parahaemolyticus,
thermostable direct haemolysin (tdh) and thermostable direct related haemolysin
(trh) genes, Vibrio cholerae and Vibrio vulnificus .23
Annex D (informative) Real-time PCR for the detection of Vibrio parahaemolyticus,
thermostable direct haemolysin gene (tdh) and Vibrio vulnificus .27
Annex E (informative) Results of an interlaboratory study .29
Bibliography .32
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Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/ directives).
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constitute an endorsement.
For an explanation on the meaning of ISO specific terms and expressions related to conformity assessment,
as well as information about ISO’s adherence to the World Trade Organization (WTO) principles in the
Technical Barriers to Trade (TBT) se
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 21872-1
Première édition
2017-06
Microbiologie de la chaîne
alimentaire — Méthode horizontale
pour la détermination des Vibrio
spp. —
Partie 1:
Recherche des espèces de Vibrio
parahaemolyticus, Vibrio cholerae
et Vibrio vulnificus potentiellement
entéropathogènes
Microbiology of the food chain — Horizontal method for the
determination of Vibrio spp. —
Part 1: Detection of potentially enteropathogenic Vibrio
parahaemolyticus, Vibrio cholerae and Vibrio vulnificus
Numéro de référence
©
ISO 2017
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Sommaire Page
Avant-propos .v
Introduction .vi
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 2
4 Principes . 2
4.1 Généralités . 2
4.2 Premier enrichissement en milieu sélectif liquide . 3
4.3 Second enrichissement en milieu sélectif liquide . 3
4.4 Isolement et identification . 3
4.5 Confirmation . 3
5 Milieux de culture et réactifs . 4
5.1 Milieu d’enrichissement: eau peptonée alcaline salée (EPAS) . . 4
5.2 Milieux d’isolement sélectifs solides . 4
5.2.1 Premier milieu: milieu gélosé au thiosulfate, citrate, bile et saccharose (TCBS) . 4
5.2.2 Second milieu. 5
5.3 Gélose nutritive salée (GNS) . 5
5.4 Réactif pour la recherche de l’oxydase . 5
5.5 Essais biochimiques . 5
5.5.1 Milieu salé pour la détection de la L-lysine décarboxylase (LDC) . 5
5.5.2 Milieu salé pour la détection de l’arginine dihydrolase (ADH) . 5
5.5.3 Réactif pour la recherche de β-galactosidase . . 5
5.5.4 Milieu salé pour la recherche de l’indole . 5
5.5.5 Eaux peptonées salées . 5
5.5.6 Solution de chlorure de sodium . 5
5.6 PCR . 5
5.6.1 Tampon Tris Acétate EDTA (TAE) (ou un tampon permettant d’obtenir
des performances similaires) . 5
5.6.2 Mélange réactionnel . . 5
5.6.3 Amorces et sondes. 5
5.6.4 Témoin positif . 6
5.6.5 Témoin d’extraction négatif . 6
6 Matériel et consommables . 6
7 Échantillonnage . 7
8 Préparation de l’échantillon pour essai . 7
9 Mode opératoire (voir Figure A.1) . 7
9.1 Prise d’essai et suspension mère. 7
9.2 Premier enrichissement sélectif . 8
9.3 Second enrichissement sélectif. 8
9.4 Isolement et identification . 8
9.5 Confirmation . 9
9.5.1 Généralités . 9
9.5.2 Choix des colonies pour la confirmation et la préparation de cultures pures . 9
9.5.3 Essais d’identification présomptive .10
9.5.4 Confirmation biochimique .10
9.5.5 Confirmation par PCR . .12
9.5.6 Extraction d’ADN .13
9.5.7 PCR classique .13
9.5.8 PCR en temps réel .14
10 Expression des résultats.14
11 Caractéristiques de performance de la méthode .14
11.1 Étude interlaboratoires .14
11.2 Sensibilité .15
11.3 Spécificité .15
11.4 LD .15
12 Rapport d’essai .15
Annexe A (normative) Schéma du mode opératoire .16
Annexe B (normative) Composition et préparation des milieux de culture et des réactifs .18
Annexe C (informative) PCR classique pour la recherche de Vibrio parahaemolyticus,
des gènes de l’hémolysine thermostable directe, TDH (tdh), et de l’hémolysine
apparentée à la TDH (trh), de Vibrio cholerae et de Vibrio vulnificus .24
Annexe D (informative) PCR en temps réel pour la recherche de Vibrio parahaemolyticus,
du gène de l’hémolysine thermostable directe, TDH (tdh), et de Vibrio vulnificus .29
Annexe E (informative) Résultats d’une étude interlaboratoires .32
Bibliographie .36
iv © ISO 2017 – Tous droits réservés
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/ directives).
L’attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l’ISO (voir www .iso .org/ brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation de la conformi
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.