ISO 14501:2021
(Main)Milk and milk powder — Determination of aflatoxin M1 content — Clean-up by immunoaffinity chromatography and determination by high-performance liquid chromatography
Milk and milk powder — Determination of aflatoxin M1 content — Clean-up by immunoaffinity chromatography and determination by high-performance liquid chromatography
This document specifies a method for the determination of aflatoxin M1 content in milk and milk powder. The lowest level of validation is 0,08 µg/kg for whole milk powder, i.e. 0,008 µg/l for reconstituted liquid milk. The limit of detection (LOD) is 0,05 μg/kg for milk powder and 0,005 μg/kg for liquid milk. The limit of quantification (LOQ) is 0,1 μg/kg for milk powder and 0,01 μg/kg for liquid milk. The method is also applicable to low-fat milk, skimmed milk, low-fat milk powder and skimmed milk powder.
Lait et lait en poudre — Détermination de la teneur en aflatoxine M1 — Purification par chromatographie d'immunoaffinité et détermination par chromatographie en phase liquide à haute performance
Le présent document spécifie une méthode pour le dosage de l’aflatoxine M1 dans le lait et le lait en poudre. Le niveau de validation le plus bas est de 0,08 µg/kg de poudre de lait entier, ce qui correspond à 0,008 µg/l de lait liquide reconstitué. La limite de détection (LOD) est de 0,05 μg/kg pour le lait en poudre et de 0,005 μg/kg pour le lait liquide. La limite de quantification (LOQ) est de 0,1 μg/kg pour le lait en poudre et de 0,01 μg/kg pour le lait liquide. La méthode est également applicable au lait à faible teneur en matière grasse, au lait écrémé et au lait en poudre à faible teneur en matière grasse ou écrémé.
General Information
Relations
Standards Content (Sample)
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 14501
IDF 171
Third edition
2021-05
Milk and milk powder —
Determination of aflatoxin M content
— Clean-up by immunoaffinity
chromatography and determination
by high-performance liquid
chromatography
Lait et lait en poudre — Détermination de la teneur en aflatoxine
M — Purification par chromatographie d'immunoaffinité et
détermination par chromatographie en phase liquide à haute
performance
Reference numbers
IDF 171:2021(E)
©
ISO and IDF 2021
IDF 171:2021(E)
© ISO and IDF 2021
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Published in Switzerland
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IDF 171:2021(E)
Contents Page
Forewords .iv
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 2
5 Reagents . 2
6 Apparatus . 4
7 Sampling . 5
8 Procedure. 5
8.1 General . 5
8.2 Preparation of test samples . 5
8.2.1 Milk . 5
8.2.2 Milk powder . 5
8.3 Immunoaffinity column preparation . 6
8.4 Test sample purification . 6
8.5 High performance liquid chromatography (HPLC) . 6
8.5.1 Pump setting. 6
8.5.2 Chromatographic performance . 6
8.5.3 Calibration curve of aflatoxin M . 7
8.5.4 Analysis of the purified extracts and injection scheme . 7
9 Calculation and expression of results . 7
9.1 Skimmed milk . 7
9.1.1 Calculation . 7
9.1.2 Expression of results . 7
9.2 Skimmed milk powder . 8
9.2.1 Calculation . 8
9.2.2 Expression of results . 8
10 Precision . 8
10.1 Interlaboratory test. 8
10.2 Repeatability . 8
10.3 Reproducibility . 8
11 Test report . 9
Annex A (informative) Results of an interlaboratory trial .10
Bibliography .11
IDF 171:2021(E)
Forewords
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national
standards bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally
carried out through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which
a technical committee has been established has the right to be represented on that committee.
International organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part
in the work. ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all
matters of electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www .iso .org/ directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/ patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO's adherence to the
World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT) see www .iso .org/
iso/ foreword .html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 5,
Milk and milk products, and the International Dairy Federation (IDF), in collaboration with the European
Committee for Standardization (CEN) Technical Committee CEN/TC 302, Milk and milk products -
Methods of sampling and analysis, in accordance with the Agreement on technical cooperation between
ISO and CEN (Vienna Agreement). It is being published jointly by ISO and IDF.
This third edition cancels and replaces the second edition (ISO 14501 | IDF 171:2007), which has been
technically revised. The main changes compared with the previous edition are as follows:
— the lack of detailed explanation in some clauses was leading to variability in the way the method
was executed from one laboratory to another. Practical information from skilled end users familiar
with routine analysis using this protocol was taken into account in this revision to clarify those
ambiguous clauses.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www .iso .org/ members .html.
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IDF 171:2021(E)
IDF (the International Dairy Federation) is a non-profit private sector organization representing the
interests of various stakeholders in dairying at the global level. IDF members are organized in National
Committees, which are national associations composed of representatives of dairy-related national
interest groups including dairy farmers, dairy processing industry, dairy suppliers, academics and
governments/food control authorities.
ISO and IDF collaborate closely on all matters of standardization relating to methods of analysis
and sampling for milk and milk products. Since 2001, ISO and IDF jointly publish their International
Standards using the logos and reference numbers of both organizations.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. IDF shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www .iso .org/ patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
This document was prepared by the IDF Standing Committee on Analytical Methods for Additives and
Contaminants and ISO Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 5, Milk and milk
products. It is being published jointly by ISO and IDF.
The work was carried out by the IDF-ISO Action Team on A12 of the Standing Committee on Analytical
Methods for Additives and Contaminants under the aegis of its project leader Mr Paul Jamieson.
INTERNATIONAL STANDARD
IDF 171:2021(E)
Milk and milk powder — Determination of aflatoxin M
content — Clean-up by immunoaffinity chromatography
and determination by high-performance liquid
chromatography
CAUTION 1 — The method described in this document requires the use of solutions of
aflatoxin M . Aflatoxins are carcinogenic to humans. Attention is drawn to the statement made
[1][2]
by the International Agency for Research on Cancer (WHO) .
CAUTION 2 — Adequately protect the laboratory in which the analyses are performed from
daylight and keep aflatoxin M standard solutions protected from light, e.g. by using aluminium
foil.
CAUTION 3 — The use of non-acid-washed glassware (e.g. tubes, vials, flasks, beakers, syringes)
for aqueous aflatoxin solutions can cause loss of aflatoxin M . Moreover, brand new laboratory
glassware, before coming into contact with aqueous solutions of aflatoxin M , should be soaked
in dilute acid (e.g. sulfuric acid, c = 2 mol/l) for several hours, then rinsed well with distilled
water to remove all traces of acid (check to ensure pH is in the range 6 to 8).
CAUTION 4 — Use decontamination procedures for laboratory wastes such as solid compounds,
solutions in organic solvents, aqueous solutions and spills, and for glassware coming into contact
with carcinogenic materials. Suitable decontamination procedures have been developed and
[1][2]
validated by the International Agency for Research on
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 14501
FIL 171
Troisième édition
2021-05
Lait et lait en poudre — Détermination
de la teneur en aflatoxine M —
Purification par chromatographie
d'immunoaffinité et détermination
par chromatographie en phase liquide
à haute performance
Milk and milk powder — Determination of aflatoxin M content —
Clean-up by immunoaffinity chromatography and determination by
high-performance liquid chromatography
Numéros de référence
FIL 171:2021(F)
©
ISO et FIL 2021
FIL 171:2021(F)
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publication ne peut être reproduite ni utilisée sous quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique,
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être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
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Publié en Suisse
ii © ISO et FIL 2021 – Tous droits réservés
FIL 171:2021(F)
Sommaire Page
Avant-propos .iv
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe . 2
5 Réactifs . 2
6 Appareillage . 4
7 Échantillonnage . 5
8 Mode opératoire. 5
8.1 Généralités . 5
8.2 Préparation des échantillons pour essai . 5
8.2.1 Lait . 5
8.2.2 Lait en poudre . 6
8.3 Préparation de la colonne d’immunoaffinité . 6
8.4 Purification de l’échantillon pour essai . 6
8.5 Chromatographie en phase liquide à haute performance (CLHP) . 7
8.5.1 Réglage de la pompe . 7
8.5.2 Performances chromatographiques . 7
8.5.3 Courbe d’étalonnage de l’aflatoxine M . 7
8.5.4 Analyse des extraits purifiés et programme d’injection . 7
9 Calcul et expression des résultats . 8
9.1 Lait écrémé . 8
9.1.1 Calcul . 8
9.1.2 Expression des résultats . 8
9.2 Poudre de lait écrémé . 8
9.2.1 Calcul . 8
9.2.2 Expression des résultats . 8
10 Fidélité . 8
10.1 Essai interlaboratoires . 8
10.2 Répétabilité . 9
10.3 Reproductibilité . 9
11 Rapport d’essai . 9
Annexe A (informative) Résultats d’un essai interlaboratoires .10
Bibliographie .11
© ISO et FIL 2021 – Tous droits réservés iii
FIL 171:2021(F)
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir www
.iso .org/ directives).
L’attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l’ISO (voir www .iso .org/ brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion
de l’ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir www .iso .org/ avant -propos.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-
comité SC 5, Lait et produits laitiers, et la Fédération internationale du lait (FIL), en collaboration avec
le comité technique CEN/TC 302, Lait et produits laitiers - Méthodes d’échantillonnage et d’analyse, du
Comité européen de normalisation (CEN), conformément à l’Accord de coopération technique entre
l’ISO et le CEN (Accord de Vienne). Il est publié conjointement par l’ISO et la FIL.
Cette troisième édition annule et remplace la deuxième édition (ISO 14501 | FIL 171:2007), qui a fait
l’objet d’une révision technique. Les principales modifications par rapport à l’édition précédente sont
les suivantes:
— le manque d’explications détaillées dans certains articles conduisait à une variabilité de la manière
d’exécuter la méthode d’un laboratoire à l’autre. Des informations pratiques fournies par des
utilisateurs finals qualifiés connaissant bien l’analyse de routine et utilisant ce protocole ont été
prises en compte lors de la révision afin de clarifier ces articles ambigus.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www .iso .org/ fr/ members .html.
iv © ISO et FIL 2021 – Tous droits réservés
FIL 171:2021(F)
La FIL (Fédération internationale du lait) est une organisation privée à but non lucratif qui représente
les intérêts des divers acteurs de la filière laitière au niveau international. Les membres de la FIL sont
organisés en comités nationaux, qui sont des associations nationales composées de représentants de
groupes d’intérêt nationaux dans le secteur des produits laitiers, incluant des producteurs laitiers, des
acteurs de l’industrie de transformation des produits laitiers, des fournisseurs de produits laitiers, des
universitaires et des représentants des gouvernements/autorités chargées du contrôle des aliments.
L’ISO et la FIL collaborent étroitement à toutes les activités de normalisation concernant les méthodes
d’analyse et d’échantillonnage du lait et des produits laitiers. Depuis 2001, l’ISO et la FIL publient
conjointement leurs Normes internationales en utilisant les logos et les numéros de référence des deux
organisations.
L’attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. La FIL ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l’ISO (voir www .iso .org/ brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Le présent document a été élaboré par le Comité permanent chargé des Méthodes d’analyse des additifs
et contaminants (SCAMC) de la Fédération internationale du lait (FIL) et le comité technique ISO/TC 34,
Produits alimentaires, sous-comité SC 5, Lait et produits laitiers. Il est publié conjointement par l’ISO et la
FIL.
L’ensemble des travaux a été confié à l’équipe d’action mixte ISO-FIL (A12) du Comité permanent
chargé des Méthodes d’analyse des additifs et contaminants, sous la conduite de son chef de projet,
monsieur Paul Jamieson.
© ISO et FIL 2021 – Tous droits réservés v
NORME INTERNATIONALE
FIL 171:2021(F)
Lait et lait en poudre — Détermination de la teneur
en aflatoxine M — Purification par chromatographie
d'immunoaffinité et détermination par chromatographie
en phase liquide à haute performance
AVERTISSEMENT 1 — La méthode décrite dans le présent document nécessite l’utilisation de
solutions d’aflatoxine M . Les aflatoxines sont cancérigènes pour l’homme. L’attention est
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.