ISO 22959:2009
(Main)Animal and vegetable fats and oils — Determination of polycyclic aromatic hydrocarbons by on-line donor-acceptor complex chromatography and HPLC with fluorescence detection
Animal and vegetable fats and oils — Determination of polycyclic aromatic hydrocarbons by on-line donor-acceptor complex chromatography and HPLC with fluorescence detection
ISO 22959:2009 specifies a high performance liquid chromatographic (HPLC) procedure for the determination of polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) in edible fats and oils. The method has been validated for coconut, olive, sunflower, and soybean oil, and is possibly applicable to other oils, dependent on the determination of appropriate parameters. The lowest level of quantification for the PAHs is 0,1 µg/kg. The lowest possible amount of each PAH which can be distinguished from the baseline noise has not been determined. The validated concentration range of the method is 0,1 µg/kg to 3,5 µg/kg for each individual PAH. For samples containing (light) PAH contents > 3,5 µg/kg, dilution to bring the contents into the validated range is possible. It is also possible to adjust the range of the calibration curves. However, ranges exceeding 3,5 µg/kg have not been validated. PAHs which can be determined by this method are: anthracene, phenanthrene, fluoranthene, pyrene, chrysene, benzo[a]anthracene, benzo[e]pyrene, benzo[a]pyrene, perylene, benzo[ghi]perylene, anthanthrene, dibenzo[a,h]anthracene, coronene, indeno[1,2,3-cd]pyrene, benzo[a]fluoranthene, benzo[b]fluoranthene, benzo[k]fluoranthene.
Corps gras d'origines animale et végétale — Détermination de la teneur en hydrocarbures aromatiques polycycliques par chromatographie de complexe donneur-accepteur et CLHP avec détection par fluorescence
L'ISO 22959:2009 spécifie un mode opératoire de chromatographie liquide à haute performance (CLHP) permettant de déterminer la teneur en hydrocarbures aromatiques polycycliques (HAP) dans les corps gras comestibles. La méthode a été validée pour l'huile de coco (CN), l'huile d'olive (OV), l'huile de tournesol (SF) et l'huile de soja (BO) et peut être applicable à d'autres huiles après détermination des paramètres appropriés. La plus faible limite de quantification pour l'ensemble des HAP est fixée à 0,1 μg/kg. La plus petite quantité de chaque HAP qu'il est possible de distinguer des signaux parasites n'a pas été déterminée. La plage de concentration validée pour la méthode est comprise entre 0,1 μg/kg et 3,5 μg/kg pour chaque HAP. Dans le cas de teneurs en HAP (légers) supérieures à 3,5 μg/kg, il est possible de diluer les échantillons afin d'amener la teneur dans la plage validée. Il est également possible de régler le domaine de travail des courbes d'étalonnage. Cependant, les domaines supérieurs à 3,5 μg/kg n'ont pas été validés. La présente méthode permet de déterminer les HAP suivants: anthracène, phénanthrène, fluoranthène, pyrène, chrysène, benz[a]anthracène, benzo[e]pyrène, benzo[a]pyrène, pérylène, benzo[ghi]pérylène, anthanthrène, dibenz[a,h]anthracène, coronène, indéno[1,2,3-cd]pyrène, benzo[a]fluoranthène, benzo[b]fluoranthène, benzo[k]fluoranthène.
General Information
Relations
Buy Standard
Standards Content (Sample)
INTERNATIONAL ISO
STANDARD 22959
First edition
2009-05-15
Animal and vegetable fats and oils —
Determination of polycyclic aromatic
hydrocarbons by on-line donor-acceptor
complex chromatography and HPLC with
fluorescence detection
Corps gras d'origines animale et végétale — Détermination de la teneur
en hydrocarbures aromatiques polycycliques par chromatographie de
complexe donneur-accepteur et CLHP avec détection par fluorescence
Reference number
©
ISO 2009
PDF disclaimer
This PDF file may contain embedded typefaces. In accordance with Adobe's licensing policy, this file may be printed or viewed but
shall not be edited unless the typefaces which are embedded are licensed to and installed on the computer performing the editing. In
downloading this file, parties accept therein the responsibility of not infringing Adobe's licensing policy. The ISO Central Secretariat
accepts no liability in this area.
Adobe is a trademark of Adobe Systems Incorporated.
Details of the software products used to create this PDF file can be found in the General Info relative to the file; the PDF-creation
parameters were optimized for printing. Every care has been taken to ensure that the file is suitable for use by ISO member bodies. In
the unlikely event that a problem relating to it is found, please inform the Central Secretariat at the address given below.
© ISO 2009
All rights reserved. Unless otherwise specified, no part of this publication may be reproduced or utilized in any form or by any means,
electronic or mechanical, including photocopying and microfilm, without permission in writing from either ISO at the address below or
ISO's member body in the country of the requester.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Published in Switzerland
ii © ISO 2009 – All rights reserved
Contents Page
Foreword. iv
Introduction . v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions. 1
4 Principle. 2
5 Reagents, materials and standards . 3
6 Apparatus . 5
7 Sampling and preparation of the test sample. 5
8 Sample preparation . 6
9 Procedure . 7
9.1 HPLC analysis . 7
9.2 Identification of PAHs. 7
10 Calculation of individual PAHs. 7
11 Method validation data. 8
11.1 Accuracy. 8
11.2 Within-laboratory precision . 8
11.3 Recovery. 8
11.4 Dynamic range . 8
11.5 Limit of quantification . 8
12 Precision. 9
12.1 International collaborative trial . 9
12.2 Repeatability. 9
12.3 Reproducibility. 9
13 Test report . 9
Annex A (informative) Example of the individual parts of an HPLC system. 10
Annex B (informative) Example of the operating conditions of the pumps of the HPLC system. 11
Annex C (informative) Example of the operating conditions of the column thermostat and
the detector of the HPLC system . 12
Annex D (informative) Example of the autosampler programme of the HPLC system. 13
Annex E (informative) Tubing connections of the HPLC system. 14
Annex F (informative) Chromatogram of a standard calibration sample . 15
Annex G (informative) Determination precision for a sunflower oil, range 0,1 µg/kg to 3,5 µg/kg. 16
Annex H (informative) Determination precision for an olive oil, range 0,1 µg/kg to 3,5 µg/kg. 17
Annex I (informative) Determination precision for a soybean oil, range 0,1 µg/kg to 3,5 µg/kg. 18
Annex J (informative) Determination precision for a coconut oil, range 0,1 µg/kg to 3,5 µg/kg. 19
Annex K (informative) Interlaboratory test . 20
Bibliography . 22
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards bodies
(ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out through ISO
technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical committee has been
established has the right to be represented on that committee. International organizations, governmental and
non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work. ISO collaborates closely with the
International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of electrotechnical standardization.
International Standards are drafted in accordance with the rules given in the ISO/IEC Directives, Part 2.
The main task of technical committees is to prepare International Standards. Draft International Standards
adopted by the technical committees are circulated to the member bodies for voting. Publication as an
International Standard requires approval by at least 75 % of the member bodies casting a vote.
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of patent
rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights.
ISO 22959 was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 11, Animal
and vegetable fats and oils.
iv © ISO 2009 – All rights reserved
Introduction
Polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) are formed during pyrolytic processes such as the incomplete
combustion of organic substances or have a petrogenic origin (mineral oils). Edible fats and oils may be
contaminated by environmental pollution and/or processing steps prior to refining. The presence of PAHs in
fats and oils is a health concern due to their carcinogenicity. Different levels of PAHs have been observed in
crude edible oils. Refining of the oils (deodorization, bleaching, charcoal treatment) under the appropriate
conditions reduces the content of the individual PAHs to the microgram per kilogram level. The known
methods of analysis of PAHs in edible fats and oils include complex and laborious extraction and clean-up
procedures to isolate the low levels of PAHs present.
With the donor-acceptor complex-chromatography (DACC) technique, PAHs can be extracted from different
matrices. PAHs are electron donors (π-electrons) and the strong interaction of the PAHs with an electron
acceptor stationary phase results in retention of the PAHs and elution of (the bulk of) the other components of
the oil. This International Standard specifies an automated on-line method for the determination of PAHs in
edible oils and fats, which can easily be applied as a routine analysis. The method consists of an LC-LC
coupling of a clean-up DACC column to an analytical column for the separation. PAHs are quantified by
fluorescence detection.
Compared to older techniques, this automated on-line method significantly reduces the amount of solvent
used and saves considerable time. The DACC column clean-up is fast and is carried out during the HPLC run
of the previous sample. The total analysis time for one sample is approximately 90 min, compared with the
traditional methods which require 8 h to 10 h. Moreover, the system can run 24 h/day. Finally, losses of
volatile PAHs during solvent evaporation, for example, are eliminated. The quantification limits of 0,1 µg/kg of
the individual PAHs have been retained with the DACC method, which automatically corrects for possibly
incomplete recoveries because the calibration samples are subjected to the same treatment as the samples to
be analysed. The system uses conventional HPLC instrumentation.
INTERNATIONAL STANDARD ISO 22959:2009(E)
Animal and vegetable fats and oils — Determination of
polycyclic aromatic hydrocarbons by on-line donor-acceptor
complex chromatography and HPLC with fluorescence
detection
1 Scope
This International Standard specifies a high performance liquid chromatographic (HPLC) procedure for the
determination of polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) in edible fats and oils.
The method has been validated for coconut (CN), olive (OV), sunflower (SF), and soybean (BO) oil, and is
possibly applicable to other oils, dependent on the determination of appropriate parameters.
The lowest level of quantification for the PAHs is 0,1 µg/kg. The lowest possible amount of each PAH which
can be distinguished from the baseline noise has not been determined. The validated concentration range of
the method is 0,1 µg/kg to 3,5 µg/kg for each individual PAH. For samples containing (light) PAH contents
> 3,5 µg/kg, dilution to bring the contents into the validated range is possible. It is also possible to adjust the
range of the calibration curves. However, ranges exceeding 3,5 µg/kg have not been validated.
PAHs which can be determined by this method are: anthracene, phenanthrene, fluoranthene, pyrene,
chrysene, benzo[a]anthracene, benzo[e]pyrene, benzo[a]pyrene, perylene, benzo[ghi]perylene, anthanthrene,
dibenzo[a,h]anthracene, coronene, indeno[1,2,3-cd]pyrene, benzo[a]fluoranthene, benzo[b]fluoranthene,
benzo[k]fluoranthene.
2 Normative references
The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated
references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced
document (including any amendments) applies.
ISO 661, Animal and vegetable fats and oils — Preparation of test sample
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
3.1
polycyclic aromatic hydrocarbon
PAH
compound that contains two or more condensed (fused) aromatic hydrocarbon rings and whose content can
be determined according to the method specified in this International Standard
3.2
light polycyclic aromatic hydrocarbon
compound with two to four condensed (fused) aromatic hydrocarbon rings
EXAMPLES
Compound CAS No. Compound CAS No. Compound CAS No.
acenaphthene 83-32-9 benzo[e]pyrene 192-97-2 naphthalene 50-32-8
acenaphthylene 208-96-8 chrysene 218-01-9 phenanthrene 85-01-8
anthracene 120-12-7 fluoranthene 206-44-0 pyrene 129-00-0
benzo[a]anthracene
56-55-3 fluorene 86-73-7
(1,2-benzoanthracene)
3.3
heavy polycyclic aromatic hydrocarbon
compound with five and more condensed (fused) aromatic hydrocarbon rings
EXAMPLES
Compound CAS No. Compound CAS No. Compound CAS No.
dibenzo[a,h]anthracene
benzo[a]pyrene
50-32-8 benzo[k]fluoranthene 207-08-9 (1,2,5,6- 53-70-3
(1,2-benzopyrene)
dibenzoanthracene)
benzo[ghi]perylene
benzo[a]fluoranthene 203-33-8 191-24-2 indeno[1,2,3-cd]pyrene 193-39-5
(1,12-benzoperylene)
benzo[b]fluoranthene 205-99-2 coronene 191-07-1 perylene 198-55-0
3.4
polycyclic aromatic hydrocarbon content
mass fraction of a polycyclic aromatic hydrocarbon or polycyclic aromatic hydrocarbon m
...
NORME ISO
INTERNATIONALE 22959
Première édition
2009-05-15
Corps gras d'origines animale et
végétale — Détermination de la teneur
en hydrocarbures aromatiques
polycycliques par chromatographie
de complexe donneur-accepteur et CLHP
avec détection par fluorescence
Animal and vegetable fats and oils — Determination of polycyclic
aromatic hydrocarbons by on-line donor-acceptor complex
chromatography and HPLC with fluorescence detection
Numéro de référence
©
ISO 2009
PDF – Exonération de responsabilité
Le présent fichier PDF peut contenir des polices de caractères intégrées. Conformément aux conditions de licence d'Adobe, ce fichier
peut être imprimé ou visualisé, mais ne doit pas être modifié à moins que l'ordinateur employé à cet effet ne bénéficie d'une licence
autorisant l'utilisation de ces polices et que celles-ci y soient installées. Lors du téléchargement de ce fichier, les parties concernées
acceptent de fait la responsabilité de ne pas enfreindre les conditions de licence d'Adobe. Le Secrétariat central de l'ISO décline toute
responsabilité en la matière.
Adobe est une marque déposée d'Adobe Systems Incorporated.
Les détails relatifs aux produits logiciels utilisés pour la création du présent fichier PDF sont disponibles dans la rubrique General Info
du fichier; les paramètres de création PDF ont été optimisés pour l'impression. Toutes les mesures ont été prises pour garantir
l'exploitation de ce fichier par les comités membres de l'ISO. Dans le cas peu probable où surviendrait un problème d'utilisation,
veuillez en informer le Secrétariat central à l'adresse donnée ci-dessous.
DOCUMENT PROTÉGÉ PAR COPYRIGHT
© ISO 2009
Droits de reproduction réservés. Sauf prescription différente, aucune partie de cette publication ne peut être reproduite ni utilisée sous
quelque forme que ce soit et par aucun procédé, électronique ou mécanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans l'accord écrit
de l'ISO à l'adresse ci-après ou du comité membre de l'ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Publié en Suisse
ii © ISO 2009 – Tous droits réservés
Sommaire Page
Avant-propos. v
Introduction . vi
1 Domaine d'application. 1
2 Références normatives . 1
3 Termes et définitions. 1
4 Principe. 2
5 Réactifs, matériaux et étalons . 3
6 Appareillage . 5
7 Échantillonnage et préparation de l'échantillon pour essai. 6
8 Préparation des échantillons. 6
9 Mode opératoire . 7
9.1 Analyse CLHP . 7
9.2 Identification des HAP. 7
10 Calculs des différents HAP. 8
11 Données de validation de la méthode . 8
11.1 Exactitude. 8
11.2 Fidélité intralaboratoire. 8
11.3 Récupération . 9
11.4 Plage dynamique . 9
11.5 Limite de quantification. 9
12 Fidélité . 9
12.1 Essai interlaboratoires international . 9
12.2 Répétabilité. 9
12.3 Reproductibilité. 9
13 Rapport d'essai . 9
Annexe A (informative) Exemple des parties constitutives d'un système de CLHP. 10
Annexe B (informative) Exemple de conditions de fonctionnement des pompes du système
de CLHP . 11
Annexe C (informative) Exemple de conditions de fonctionnement du thermostat de colonne et
du détecteur du système de CLHP . 12
Annexe D (informative) Exemple de programme de l'échantillonneur automatique du système de
CLHP . 13
Annexe E (informative) Raccords de tubulures du système de CLHP . 14
Annexe F (informative) Chromatogramme d'un échantillon étalon . 15
Annexe G (informative) Fidélité de la détermination pour une huile de tournesol, plage allant de
0,1 µg/kg à 3,5 µg/kg . 16
Annexe H (informative) Fidélité de la détermination pour une huile d'olive, plage allant de
0,1 µg/kg à 3,5 µg/kg . 17
Annexe I (informative) Fidélité de la détermination pour une huile de soja, plage allant de
0,1 µg/kg à 3,5 µg/kg . 18
Annexe J (informative) Fidélité de la détermination pour une huile de coco, plage allant de
0,1 µg/kg à 3,5 µg/kg . 19
Annexe K (informative) Essai interlaboratoires. 20
Bibliographie . 22
iv © ISO 2009 – Tous droits réservés
Avant-propos
L'ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d'organismes nationaux de
normalisation (comités membres de l'ISO). L'élaboration des Normes internationales est en général confiée
aux comités techniques de l'ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude a le droit de faire partie du
comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non
gouvernementales, en liaison avec l'ISO participent également aux travaux. L'ISO collabore étroitement avec
la Commission électrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation électrotechnique.
Les Normes internationales sont rédigées conformément aux règles données dans les Directives ISO/CEI,
Partie 2.
La tâche principale des comités techniques est d'élaborer les Normes internationales. Les projets de Normes
internationales adoptés par les comités techniques sont soumis aux comités membres pour vote. Leur
publication comme Normes internationales requiert l'approbation de 75 % au moins des comités membres
votants.
L'attention est appelée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l'objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L'ISO ne saurait être tenue pour responsable de ne
pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence.
L'ISO 22959 a été élaborée par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-comité SC 11,
Corps gras d'origines animale et végétale.
Introduction
Les hydrocarbures aromatiques polycycliques (HAP) se forment lors des processus de pyrolyse, comme la
combustion incomplète des substances organiques ou d'origine pétrolière (huiles minérales). Les corps gras
comestibles peuvent être contaminés par la pollution environnementale et/ou lors des étapes de traitement
précédant le raffinage. La présence d'hydrocarbures aromatiques polycycliques dans les corps gras
présentent un danger pour la santé en raison de leur carcinogénicité. Différents niveaux d'hydrocarbures
aromatiques polycycliques ont été observés dans les corps gras comestibles bruts. Le raffinage des huiles
(désodorisation, blanchiment/décoloration, traitement au charbon actif) dans les conditions appropriées réduit
la teneur des différents hydrocarbures aromatiques polycycliques à un niveau de l'ordre de quelques
microgrammes par kilogramme. Parmi les méthodes connues d'analyse des hydrocarbures aromatiques
polycycliques dans les corps gras comestibles figurent des modes opératoires complexes d'extraction et de
purification permettant d'isoler les hydrocarbures aromatiques polycycliques présents à l'état de traces.
La technique par chromatographie de complexe donneur-accepteur (DACC) permet d'extraire les
hydrocarbures aromatiques polycycliques à partir de plusieurs matrices. Les hydrocarbures aromatiques
polycycliques sont des donneurs d'électrons (électrons π) et la forte interaction qui existe entre les
hydrocarbures aromatiques polycycliques et une phase stationnaire acceptant les électrons se traduit par la
rétention des hydrocarbures aromatiques polycycliques et l'élution du plus gros des autres composants de
l'huile. La présente Norme internationale spécifie une méthode en ligne automatisée de détermination de la
teneur en hydrocarbures aromatiques polycycliques des corps gras comestibles pouvant être utilisée
facilement comme analyse de routine. Cette méthode est réalisée par couplage LC-LC d'une colonne de
chromatographie de complexe donneur-accepteur de purification et d'une colonne d'analyse pour la
séparation. Les hydrocarbures aromatiques polycycliques sont quantifiés par détection par fluorescence.
Comparée à des techniques plus anciennes, cette méthode en ligne automatisée réduit de manière
significative la quantité de solvant utilisée et permet un gain de temps substantiel. La purification par colonne
de chromatographie de complexe donneur-accepteur est rapide et est réalisée en même temps que la CLHP
de l'échantillon précédent. L'analyse complète d'un échantillon s'effectue en 90 min environ, contre 8 h à 10 h
par les méthodes classiques. En outre, le système peut tourner 24h/24. Enfin, cette méthode élimine les
pertes d'hydrocarbures aromatiques polycycliques volatils se produisant par exemple lors de l'évaporation du
solvant. Une limite de quantification de 0,1 µg/kg pour chaque hydrocarbure aromatique polycyclique a été
retenue avec la méthode par chromatographie de complexe donneur-accepteur, qui corrige automatiquement
les éventuelles récupérations incomplètes car les échantillons pour étalonnage sont soumis au même
traitement que les échantillons pour analyse. Le système utilise des appareils de CLHP classiques.
vi © ISO 2009 – Tous droits réservés
NORME INTERNATIONALE ISO 22959:2009(F)
Corps gras d'origines animale et végétale — Détermination de
la teneur en hydrocarbures aromatiques polycycliques par
chromatographie de complexe donneur-accepteur et CLHP
avec détection par fluorescence
1 Domaine d'application
La présente Norme internationale spécifie un mode opératoire de chromatographie liquide à haute
performance (CLHP) permettant de déterminer la teneur en hydrocarbures aromatiques polycycliques (HAP)
dans les corps gras comestibles.
La méthode a été validée pour l'huile de coco (CN), l'huile d'olive (OV), l'huile de tournesol (SF) et l'huile de
soja (BO) et peut être applicable à d'autres huiles après détermination des paramètres appropriés.
La plus faible limite de quantification pour l'ensemble des HAP est fixée à 0,1 µg/kg. La plus petite quantité de
chaque HAP qu'il est possible de distinguer des signaux parasites n'a pas été déterminée. La plage de
concentration validée pour la méthode est comprise entre 0,1 µg/kg et 3,5 µg/kg pour chaque HAP. Dans le
cas de teneurs en HAP (légers) supérieures à 3,5 µg/kg, il e
...
МЕЖДУНАРОДНЫЙ ISO
СТАНДАРТ 22959
Первое издание
2009-05-15
Жиры и масла животные и
растительные. Определение
полициклических ароматических
углеводородов методом донорно-
акцепторной комплексной
хроматографии в режиме онлайн и
высокоэффективной жидкостной
хроматографией (HPLC) с
флуоресцентным обнаружением
Animal and vegetable fats and oils – Determination of polycyclic
aromatic hydrocarbons by on-line donor-acceptor complex
chromatography and HPLC with fluorescence detection
Ответственность за подготовку русской версии несёт GOST R
(Российская Федерация) в соответствии со статьёй 18.1 Устава ISO
Ссылочный номер
©
ISO 2009
Отказ от ответственности при работе в PDF
Настоящий файл PDF может содержать интегрированные шрифты. В соответствии с условиями лицензирования, принятыми
фирмой Adobe, этот файл можно распечатать или смотреть на экране, но его нельзя изменить, пока не будет получена
лицензия на интегрированные шрифты и они не будут установлены на компьютере, на котором ведется редактирование. В
случае загрузки настоящего файла заинтересованные стороны принимают на себя ответственность за соблюдение
лицензионных условий фирмы Adobe. Центральный секретариат ISO не несет никакой ответственности в этом отношении.
Adobe - торговый знак фирмы Adobe Systems Incorporated.
Подробности, относящиеся к программным продуктам, использованные для создания настоящего файла PDF, можно найти в
рубрике General Info файла; параметры создания PDF были оптимизированы для печати. Были приняты во внимание все
меры предосторожности с тем, чтобы обеспечить пригодность настоящего файла для использования комитетами-членами
ISO. В редких случаях возникновения проблемы, связанной со сказанным выше, просьба проинформировать Центральный
секретариат по адресу, приведенному ниже.
ДОКУМЕНТ ЗАЩИЩЕН АВТОРСКИМ ПРАВОМ
© ISO 2009
Все права сохраняются. Если не указано иное, никакую часть настоящей публикации нельзя копировать или использовать в
какой-либо форме или каким-либо электронным или механическим способом, включая фотокопии и микрофильмы, без
предварительного письменного согласия ISO, которое должно быть получено после запроса о разрешении, направленного по
адресу, приведенному ниже, или в комитет-член ISO в стране запрашивающей стороны.
ISO copyright office
Case postale 56 • CH-1211 Geneva 20
Tel. + 41 22 749 01 11
Fax + 41 22 749 09 47
E-mail copyright@iso.org
Web www.iso.org
Опубликовано в Швейцарии
ii © ISO 2009 – Все права сохраняются
Содержание Страница
Предисловие .iv
Введение .v
1 Область применения .1
2 Нормативные ссылки .1
3 Термины и определения .1
4 Сущность метода.2
5 Реактивы, материалы и стандарты .3
6 Аппаратура.5
7 Отбор проб и подготовка образцов для испытания .5
8 Подготовка образцов.6
9 Проведение испытания.7
9.1 Анализ HPLC.7
9.2 Идентификация PAH .7
10 Расчет отдельных PAH.8
11 Данные валидации метода.8
11.1 Точность.8
11.2 Внутрилабораторная прецизионность.8
11.3 Возврат.9
11.4 Динамический диапазон.9
11.5 Предел количественного анализа.9
12 Прецизионность.9
12.1 Международное межлабораторное испытание.9
12.2 Повторяемость .9
12.3 Воспроизводимость .9
13 Протокол испытания.9
Приложение A (информативное) Примеры отдельных частей системы HPLC.10
Приложение B (информативное) Пример рабочих условий для насосов системы HPLC .11
Приложение C (информативное) Пример рабочих условий термостата колонки и детектора
системы HPLC .12
Приложение D (информативное) Пример программы автоматического дозатора системы HPLC. 13
Приложение E (информативное) Соединение трубок в системе HPLC.14
Приложение F (информативное) Хроматограмма стандартного калибровочного образца.15
Приложение G (информативное) Прецизионность определения для подсолнечного масла,
диапазон концентраций от 0,1 мкг/кг до 3,5 мкг/кг .16
Приложение H (информативное) Прецизионность определения для оливкового масла,
диапазон концентраций от 0,1 мкг/кг до 3,5 мкг/кг .17
Приложение I (информативное) Прецизионность определения для соевого масла,
диапазон концентраций от 0,1 мкг/кг до 3,5 мкг/кг .18
Приложение J (информативное) Прецизионность определения для кокосового масла,
диапазон концентраций от 0,1 мкг/кг до 3,5 мкг/кг .19
Приложение K (информативное) Межлабораторное испытание.20
Библиография.22
Предисловие
Международная организация по стандартизации (ISO) представляет собой всемирную федерацию,
состоящую из национальных органов по стандартизации (комитеты-члены ISO). Работа по разработке
международных стандартов обычно ведется Техническими комитетами ISO. Каждый комитет-член,
заинтересованный в теме, для решения которой образован данный технический комитет, имеет право
быть представленным в этом комитете. Международные организации, правительственные и
неправительственные, поддерживающие связь с ISO, также принимают участие в работе. ISO тесно
сотрудничает с Международной электротехнической комиссией (IEC) по всем вопросам
стандартизации в области электротехники.
Международные стандарты разрабатываются в соответствии с правилами, установленными в Части 2
Директив ISO/IEC.
Основное назначение технических комитетов заключается в разработке международных стандартов.
Проекты международных стандартов, принятые Техническими комитетами, направляются комитетам-
членам на голосование. Для их опубликования в качестве международных стандартов требуется
одобрение не менее 75 % комитетов-членов, участвовавших в голосовании.
Внимание обращается на тот факт, что отдельные элементы данного документы могут составлять
предмет патентных прав. ISO не несет ответственность за идентификацию каких–либо или всех
подобных патентных прав.
ISO 22959 был подготовлен Техническим комитетом ISO/TC 34, Пищевые продукты, Подкомитетом
SC 11, Жиры и масла животные и растительные.
iv © ISO 2009 – Все права сохраняются
Введение
Полициклические ароматические углеводороды (PAH) образуются во время пиролитических процессов,
таких как неполное сгорание органических веществ или имеют петрогенное происхождение
(минеральные масла). Пищевые жиры и масла могут быть загрязнены из окружающей среды и/или на
этапе обработки перед рафинированием. Присутствие PAH в жирах и маслах касается здоровья,
поскольку эти соединения являются канцерогенными. Различные уровни содержания PAH
наблюдаются в сырых пищевых маслах. Рафинирование масел (деодорирование, осветление,
обработка на активированном угле) в соответствующих условиях сокращает содержание отдельных
PAH в микрограммах на килограмм. Известные методы анализа PAH в пищевых жирах и маслах
включают сложную и трудоемкую экстракцию и процедуры очистки, чтобы выделить PAH,
присутствующие в очень маленьких концентрациях.
С помощью донорно-акцепторной комплексной хроматографии (DACC) PAH можно экстрагировать из
разных матриц. PAH являются донорами электронов (π-электронов), а сильное взаимодействие PAH со
стационарной фазой – акцептором электронов – дает в результате PAH и элюирование (в массе)
других компонентов масла. Настоящий международный стандарт устанавливает автоматический
метод в режиме он-лайн определения PAH в пищевых маслах и жирах, который можно легко
применять как практический анализ. Этот метод включает сочетание LC-LC очистительной колонки
DACC с аналитической колонкой для разделения. PAH количественно определяют с помощью
флуоресцентного обнаружения.
По сравнению с более старыми методами данный автоматический метод в режиме он-лайн
значительно сокращает количество используемого растворителя и сохраняет массу времени. Очистка
на колонке DACC происходит быстро и выполняется в течение прохождения предыдущей пробой
анализа с помощью HPLC (высокоэффективной жидкостной хроматографии). Общее время анализа
для одной пробы составляет порядка 90 мин, по сравнению с традиционными методами,
занимающими от 8 ч до 10 ч. Более того, система может работать по 24 ч/сутки. Наконец, устраняются
потери летучих PAH, например, при испарении растворителя. Пределы количественного анализа
0,1 мкг/кг отдельных PAH в методе DACC сохраняются, причет автоматически вносится поправка на
возможный неполный выход, поскольку калибровочные образцы подвергаются такой же обработке, как
и анализируемые пробы. Система использует традиционное оборудование для HPLC.
МЕЖДУНАРОДНЫЙ СТАНДАРТ ISO 22959:2009(R)
Жиры и масла животные и растительные. Определение
полициклических ароматических углеводородов методом
донорно-акцепторной комплексной хроматографии в
режиме онлайн и высокоэффективной жидкостной
хроматографией (HPLC) с флуоресцентным обнаружением
1 Область применения
Настоящий международный стандарт устанавливает метод высокоэффективной жидкостной
хроматографии (HPLC) для определения полициклических ароматических углеводородов (PAH) в
пищевых жирах и маслах.
Этот метод был подтвержден для кокосового (CN), оливкового (OV), подсолнечного (SF), и соевого
(BO) масла, и может применяться к другим маслам в зависимости от определения соответствующих
параметров.
Самый низкий уровень определяемой концентрации PAH составляет 0,1 мкг/кг. Самое низкое из
возможных количеств каждого PAH, который можно отличить от фонового шума, не определено.
Подтвержденный диапазон концентраций, определяемых описанным методом, составляет от 0,1 мкг/кг
до 3,5 мкг/кг для каждого отдельного PAH. Для проб, содержащих (легкие) PAH в концентрации
> 3,5 мкг/кг, возможно разбавление для приведения содержимого в подтвержденный диапазон
концентраций. Также возможно отрегулировать диапазон калибровочных кривых. Однако определение
концентраций выше 3,5 мкг/кг не подтверждено.
PAH, которые можно определить данным методом, включают: антрацен, фенантрен, флуорантен,
пирен, кризен, бензо[a]антрацен, бензо[e]пирен, бензо[a]пирен, перилен, бензо[ghi]перилен, антантрен,
дибензо[a,h]антрацен, коронен, индено[1,2,3-cd]пирелен, бензо[a]fфлуорантен, бензо[b]флуорантен,
бензо[k]флуорантен.
2 Нормативные ссылки
Нижеследующие документы являются обязательными для применения данного документа. Для
датированных ссылок действительно только указанное издание. В случае недатированных ссылок
используется последняя редакция документа, на который дается ссылка (включая все изменения).
ISO 661, Жиры и масла животные и растительные. Приготовление пробы для анализа
3 Термины и определения
Применительно к данному документу используются следующие термины и определения.
3.1
полициклический ароматический углеводород
polycyclic aromatic hydrocarbon
PAH
соединение, которое содержит два или более конденсированных (слитых) ароматических
углеводородных колец, содержание которых можно определить по методу, установленному в данном
международном стандарте.
3.2
легкий полициклический
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.