ISO/TS 12788:2022
(Main)Rapeseed — Determination of glucosinolate content — Spectrometric method for total glucosinolates by glucose release
Rapeseed — Determination of glucosinolate content — Spectrometric method for total glucosinolates by glucose release
This document specifies a method for the determination of the content of the total glucosinolates in rapeseeds (colza) using visible spectrometry to determine the glucose released from glucosinolates by hydrolysis.
Colza — Détermination de la teneur en glucosinolates — Méthode spectrométrique pour les glucosinolates totaux par libération de glucose
Le présent document spécifie une méthode pour la détermination de la teneur en glucosinolates totaux dans les graines de colza (colza) par spectrométrie visible, afin de déterminer le glucose libéré par les glucosinolates par hydrolyse.
General Information
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TECHNICAL ISO/TS
SPECIFICATION 12788
First edition
2022-05
Rapeseed — Determination
of glucosinolate content —
Spectrometric method for total
glucosinolates by glucose release
Colza — Détermination de la teneur en glucosinolates — Méthode
spectrométrique pour les glucosinolates totaux par libération de
glucose
Reference number
© ISO 2022
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Published in Switzerland
ii
Contents Page
Foreword .iv
Introduction .v
1 Scope . 1
2 Normative references . 1
3 Terms and definitions . 1
4 Principle . 1
5 Reagents . 1
6 Apparatus . 3
7 Sampling . 4
8 Preparation of the test sample. 5
8.1 Reduction of test sample to laboratory sample . 5
8.2 Moisture and volatile matter content . 5
8.3 Grinding . 5
9 Procedure .5
9.1 Test portion . 5
9.2 Extraction of glucosinolates . 5
9.2.1 General . 5
9.2.2 Principle . 5
9.2.3 Operating mode . 5
9.3 Hydrolysis and collection of glucose from glucosinolates by myrosinase and
column chromatography . 6
9.4 Glucose determination . 6
9.4.1 General . 6
9.4.2 Glucose oxidase/peroxidase glucose assay (5.4) . 6
9.4.3 Glucose hexokinase/glucose-6-phosphate dehydrogenase assay (5.8) . 7
10 Calculation of glucosinolate content . 8
11 Expression of results . 9
12 Precision . 9
12.1 Interlaboratory test . . 9
12.2 Repeatability . 9
12.3 Reproducibility . 9
12.4 Critical difference . 9
12.4.1 General . 9
12.4.2 Comparison of two groups of measurements in one laboratory . 9
12.4.3 Comparison of two groups of measurements in two laboratories . 10
13 Test report .10
Annex A (informative) Extraction and purification of myrosinase from Sinapis alba L., also
called white or yellow mustard.11
Annex B (informative) Determination of recovery of glucosinolates .15
Annex C (informative) Results of the interlaboratory test .18
Bibliography .20
iii
Foreword
ISO (the International Organization for Standardization) is a worldwide federation of national standards
bodies (ISO member bodies). The work of preparing International Standards is normally carried out
through ISO technical committees. Each member body interested in a subject for which a technical
committee has been established has the right to be represented on that committee. International
organizations, governmental and non-governmental, in liaison with ISO, also take part in the work.
ISO collaborates closely with the International Electrotechnical Commission (IEC) on all matters of
electrotechnical standardization.
The procedures used to develop this document and those intended for its further maintenance are
described in the ISO/IEC Directives, Part 1. In particular, the different approval criteria needed for the
different types of ISO documents should be noted. This document was drafted in accordance with the
editorial rules of the ISO/IEC Directives, Part 2 (see www.iso.org/directives).
Attention is drawn to the possibility that some of the elements of this document may be the subject of
patent rights. ISO shall not be held responsible for identifying any or all such patent rights. Details of
any patent rights identified during the development of the document will be in the Introduction and/or
on the ISO list of patent declarations received (see www.iso.org/patents).
Any trade name used in this document is information given for the convenience of users and does not
constitute an endorsement.
For an explanation of the voluntary nature of standards, the meaning of ISO specific terms and
expressions related to conformity assessment, as well as information about ISO’s adherence to
the World Trade Organization (WTO) principles in the Technical Barriers to Trade (TBT), see
www.iso.org/iso/foreword.html.
This document was prepared by Technical Committee ISO/TC 34, Food products, Subcommittee SC 2,
Oleaginous seeds and fruits and oilseed meals.
Any feedback or questions on this document should be directed to the user’s national standards body. A
complete listing of these bodies can be found at www.iso.org/members.html.
iv
Introduction
Glucosinolates are important antinutritional and flavour components of brassica oilseeds. They are
particularly important in brassica seeds that have been modified to reduce the level of glucosinolates
such as low glucosinolate types of rapeseed (canola). Determination of the level of glucosinolates in
these seeds often reflects the commercial value and, certainly, discrimination between seeds with high
levels of glucosinolates and those with low levels of glucosinolates is important both for commercial
testing and scientific studies. This document provides a method for the estimation of total glucosinolates
without requiring chromatographic apparatus. It complements ISO 9167, which is the reference method.
This document is a Technical Specification as the precision data issued from the collaborative trial is
not sufficient.
v
TECHNICAL SPECIFICATION ISO/TS 12788:2022(E)
Rapeseed — Determination of glucosinolate content —
Spectrometric method for total glucosinolates by glucose
release
1 Scope
This document specifies a method for the determination of the content of the total glucosinolates in
rapeseeds (colza) using visible spectrometry to determine the glucose released from glucosinolates by
hydrolysis.
2 Normative references
The following documents are referred to in the text in such a way that some or all of their content
constitutes requirements of this document. For dated references, only the edition cited applies. For
undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies.
ISO 664, Oilseeds — Reduction of laboratory sample to test sample
ISO 665, Oilseeds — Determination of moisture and volatile matter content
ISO 3696, Water for analytical laboratory use — Specification and test methods
3 Terms and definitions
For the purposes of this document, the following terms and definitions apply.
ISO and IEC maintain terminology databases for use in standardization at the following addresses:
— ISO Online browsing platform: available at https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: available at https:// www .electropedia .org/
3.1
total glucosinolates
quantity of glucose released on hydrolysis by myrosinase and determined enzymatically
Note 1 to entry: The total glucosinolates is expressed as micromoles per gram of the seeds.
4 Principle
Total glucosinolates in a ground, full-fat brassica seed sample can be determined directly by estimation
of glucose released on hydrolysis as the glucose unit is common to all glucosinolates. Hydrolysis of
glucosinolates by myrosinase quantitatively releases glucose from the glucosinolates. The glucose is
analysed using either glucose oxidase/peroxidase enzyme assay or glucose hexokinase/glucose-6-
phosphate dehydrogenase enzyme assays.
5 Reagents
Use only reagents of recognized analytical grade, unless otherwise specified, and water conforming to
grade 2 of ISO 3696.
5.1 Hydrochloric acid (2 M).
Dissolve 43 ml 36 % hydrochloric acid or 49 ml 32 % hydrochloric acid in 250 ml water.
5.2 Phenol tungstate reagent.
Dissolve 5,0 g sodium tungstate, 5,0 g sodium phosphate, dibasic, anhydrous, and 9,0 g sodium chloride
in approximately 350 ml distilled water in a 500 ml volumetric flask. Adjust pH to 3,0 with 2 M
hydrochloric acid (approximately
...
SPÉCIFICATION ISO/TS
TECHNIQUE 12788
Première édition
2022-05
Colza — Détermination de la
teneur en glucosinolates —
Méthode spectrométrique pour les
glucosinolates totaux par libération de
glucose
Rapeseed — Determination of glucosinolate content — Spectrometric
method for total glucosinolates by glucose release
Numéro de référence
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y compris la photocopie, ou la diffusion sur l’internet ou sur un intranet, sans autorisation écrite préalable. Une autorisation peut
être demandée à l’ISO à l’adresse ci-après ou au comité membre de l’ISO dans le pays du demandeur.
ISO copyright office
Case postale 401 • Ch. de Blandonnet 8
CH-1214 Vernier, Genève
Tél.: +41 22 749 01 11
E-mail: copyright@iso.org
Web: www.iso.org
Publié en Suisse
ii
Sommaire Page
Avant-propos .iv
Introduction .v
1 Domaine d’application . 1
2 Références normatives .1
3 Termes et définitions . 1
4 Principe. 1
5 Réactifs . 2
6 Appareillage . 4
7 Échantillonnage .5
8 Préparation de l’échantillon pour essai . 5
8.1 Réduction de l’échantillon pour essai en échantillon pour laboratoire . 5
8.2 Teneur en eau et en matières volatiles . 5
8.3 Broyage . 5
9 Mode opératoire . 5
9.1 Prise d’essai . 5
9.2 Extraction des glucosinolates . 6
9.2.1 Généralités . 6
9.2.2 Principe. 6
9.2.3 Mode opératoire . . 6
9.3 Hydrolyse et collecte du glucose à partir des glucosinolates par la myrosinase et
la chromatographie sur colonne . 6
9.4 Dosage du glucose . 7
9.4.1 Généralités . 7
9.4.2 Dosage du glucose par la glucose oxydase/peroxydase (5.4). 7
9.4.3 Dosage par la glucose hexokinase/glucose-6-phosphate déshydrogénase
(5.8) . 8
10 Calcul de la teneur en glucosinolates . 9
11 Expression des résultats . 9
12 Fidélité .10
12.1 Essai interlaboratoires . 10
12.2 Répétabilité . 10
12.3 Reproductibilité . 10
12.4 Différence critique . 10
12.4.1 Généralités . 10
12.4.2 Comparaison de deux groupes de mesures dans un laboratoire . 10
12.4.3 Comparaison de deux groupes de mesures dans deux laboratoires . 10
13 Rapport d’essai .11
Annexe A (informative) Extraction et purification de la myrosinase à partir de Sinapis
alba L., aussi appelée moutarde blanche ou jaune .12
Annexe B (informative) Détermination du taux de récupération des glucosinolates .16
Annexe C (informative) Résultats de l’essai interlaboratoires .19
Bibliographie .21
iii
Avant-propos
L’ISO (Organisation internationale de normalisation) est une fédération mondiale d’organismes
nationaux de normalisation (comités membres de l’ISO). L’élaboration des Normes internationales est
en général confiée aux comités techniques de l’ISO. Chaque comité membre intéressé par une étude
a le droit de faire partie du comité technique créé à cet effet. Les organisations internationales,
gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec l’ISO participent également aux travaux.
L’ISO collabore étroitement avec la Commission électrotechnique internationale (IEC) en ce qui
concerne la normalisation électrotechnique.
Les procédures utilisées pour élaborer le présent document et celles destinées à sa mise à jour sont
décrites dans les Directives ISO/IEC, Partie 1. Il convient, en particulier, de prendre note des différents
critères d’approbation requis pour les différents types de documents ISO. Le présent document a été
rédigé conformément aux règles de rédaction données dans les Directives ISO/IEC, Partie 2 (voir
www.iso.org/directives).
L’attention est attirée sur le fait que certains des éléments du présent document peuvent faire l’objet de
droits de propriété intellectuelle ou de droits analogues. L’ISO ne saurait être tenue pour responsable
de ne pas avoir identifié de tels droits de propriété et averti de leur existence. Les détails concernant
les références aux droits de propriété intellectuelle ou autres droits analogues identifiés lors de
l’élaboration du document sont indiqués dans l’Introduction et/ou dans la liste des déclarations de
brevets reçues par l’ISO (voir www.iso.org/brevets).
Les appellations commerciales éventuellement mentionnées dans le présent document sont données
pour information, par souci de commodité, à l’intention des utilisateurs et ne sauraient constituer un
engagement.
Pour une explication de la nature volontaire des normes, la signification des termes et expressions
spécifiques de l’ISO liés à l’évaluation de la conformité, ou pour toute information au sujet de l’adhésion
de l’ISO aux principes de l’Organisation mondiale du commerce (OMC) concernant les obstacles
techniques au commerce (OTC), voir le lien suivant: www.iso.org/iso/fr/avant-propos.html.
Le présent document a été élaboré par le comité technique ISO/TC 34, Produits alimentaires, sous-
comité SC 2, Graines et fruits oléagineux et farines de graines oléagineuses.
Il convient que l’utilisateur adresse tout retour d’information ou toute question concernant le présent
document à l’organisme national de normalisation de son pays. Une liste exhaustive desdits organismes
se trouve à l’adresse www.iso.org/fr/members.html.
iv
Introduction
Les glucosinolates sont des composants antinutritionels et aromatisants importants des oléagineux
Brassica. Ils sont particulièrement importants dans les graines de Brassica qui ont été modifiées
pour réduire le niveau de glucosinolates, comme les variétés de colza à faible teneur en glucosinolates
(canola). La détermination du niveau de glucosinolates dans ces graines reflète souvent la valeur
commerciale, et la distinction entre les graines avec de hauts niveaux de glucosinolates et celles avec
de faibles niveaux est évidemment importante à la fois pour les essais commerciaux et les études
scientifiques. Le présent document fournit une méthode permettant d’estimer les glucosinolates totaux
sans nécessiter d’appareil de chromatographie. Il complète l’ISO 9167, qui est la méthode de référence.
Ce document est une Spécification technique car les données de précision issues de l'essai collaboratif
ne sont pas suffisantes.
v
SPÉCIFICATION TECHNIQUE ISO/TS 12788:2022(F)
Colza — Détermination de la teneur en glucosinolates —
Méthode spectrométrique pour les glucosinolates totaux
par libération de glucose
1 Domaine d’application
Le présent document spécifie une méthode pour la détermination de la teneur en glucosinolates totaux
dans les graines de colza (colza) par spectrométrie visible, afin de déterminer le glucose libéré par les
glucosinolates par hydrolyse.
2 Références normatives
Les documents suivants sont cités dans le texte de sorte qu’ils constituent, pour tout ou partie de leur
contenu, des exigences du présent document. Pour les références datées, seule l’édition citée s’applique.
Pour les références non datées, la dernière édition du document de référence s’applique (y compris les
éventuels amendements).
ISO 664, Graines oléagineuses — Réduction de l'échantillon pour laboratoire en échantillon pour essai
ISO 665, Graines oléagineuses — Détermination de la teneur en eau et en matières volatiles
ISO 3696, Eau pour laboratoire à usage analytique — Spécification et méthodes d'essai
3 Termes et définitions
Pour les besoins du présent document, les termes et définitions suivants s’appliquent.
L’ISO et l’IEC tiennent à jour des bases de données terminologiques destinées à être utilisées en
normalisation, consultables aux adresses suivantes:
— ISO Online browsing platform: disponible à l’adresse https:// www .iso .org/ obp
— IEC Electropedia: disponible à l’adresse https:// www .electropedia .org/
3.1
glucosinolates totaux
quantité de glucose libérée lors de l’hydrolyse de la myrosinase et dosée de manière enzymatique
Note 1 à l'article: Les glucosinolates totaux sont exprimés en micromoles par gramme de graines.
4 Principe
Les glucosinolates totaux contenus dans un échantillon entier de graines de Brassica moulues peuvent
être déterminés directement par une estimation du glucose libéré lors de l’hydrolyse, car l’unité
de glucose est commune à tous
...
Questions, Comments and Discussion
Ask us and Technical Secretary will try to provide an answer. You can facilitate discussion about the standard in here.